Caracterización estructural y transcripcional de dos genes ribosómicos de "Artemia"

Abstract

En el trabajo recogido en esta tesis, se ha realizado el estudio comparativo de la estructura de dos genes ribosomicos de dos poblaciones de artemia, que se han denominado rdnas tipo i y tipo ii. Asimismo se han localizado posibles sitios de inicio de la transcripcion de estos genes. El patron de restriccion de los rdnas tipo i y tipo ii, es identico en las regiones codificantes mientras que es muy diferente en las regiones espaciadoras. Dentro de la region del espaciador intergenico mas cercana al rdna 17s se han identificado cuatro repeticiones de unos 600 pb en el rdna tipo i. En el rdna tipo ii se ha detectado en la misma posicion la existencia de tres repeticiones homologas a las del rdna tipo i; de ellas, la mas cercana al rdna 17s tiene un tamaño de unos 600 pb, mientras que las otras dos son mas pequeñas por la existencia de deleciones. Ademas, en el rdna tipo ii se ha producido en la zona mas a 5' secuenciada, la amplificacion de una region de unos 50 pb que forma parte de estas repeticiones. La secuencia de las repeticiones esta mas conservada dentro de una misma unidad de rdna que entre los dos tipos de rnda diferentes, estando la homologia distribuida de forma no homogenea a lo largo de la secuencia. Otra parte del trabajo ha llevado a la identificacion de rnas codificados por estas repeticiones del espaciador, que no terminan por delante del rdna 17s. Se han encontrado cinco extremos 5' de estos rnas en la repeticion situada mas a 3' y cuatro en la repeticion adyacente a ella. De algunos de estos rnas se ha localizado el sitio exacto de iniciacion. Los inicios de cadenas de rnas presentan un patron variable a lo largo del desarrollo temprano de artemia, pareciendo existir un mayor procesamiento a tiempos de desarrollo mayores. Por ultimo, se ha determinado el tamaño del precursor estable de los rnas de artemia siendo este de unas 8 kb.